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酶免疫測定法（Enzyme Immunoassay，簡稱EIA）是一種將酶的催化功能與抗原-抗體反應相結合的免疫學測定技術。EIA常用的方法又包括酶聯免疫吸附實驗（ELISA）、酶免疫組化法（IHC），前者測定可溶性抗原和抗體，后者測定組織中或細胞表面的抗原。該方法利用酶作為標記物，最終形成酶標記抗原抗體復合物，從而實現對目標分子的定性和定量分析。酶免分析免疫試劑具有檢測靈敏度高、特異性好、重復性高等優點。酶免疫分析試劑在生物學、醫學、環境和食品檢測等多個領域得到廣泛應用。其應用前景廣闊，特別是在臨床醫學診斷、食品安全性檢測以及環境。

酶免分析免疫試劑所需原料主要包括抗原、抗體、酶標記劑、控制品、基質和微孔板等。其中，抗原和抗體是酶免分析免疫試劑的核心原料，主要用于形成酶-抗體或酶-抗原復合物來檢測樣品中的分子。酶標記劑是將特異性抗體與酶進行反應生成的復合物。常見的酶標記劑有過氧化物酶（HRP）、堿性磷酸酶（AP）等。控制品用于確定酶免分析免疫試劑測定的準確性和可行性。基質是顯色底物和停止底物的混合物。

堿性磷酸酶(Alkaline Phosphatase ,AP)是一種膜結合糖蛋白。AP在自然界中廣泛分布，包括原核生物和更高的真核生物。其活性位點中包括兩個鋅離子和一個鎂離子，這三個位點的金屬離子對于酶活性至關重要。堿性磷酸酶可以水解各種單磷酸酯，并釋放無機磷酸鹽。1,2-二氧雜環丁烷化合物AMPPD作為一種超靈敏的堿性磷酸酶底物，在堿性磷酸酶的催化作用下，磷酸根基團水解，形成一個不穩定的中間體，自行分解后四元環斷裂釋放出大量能量，從而激發化學發光反應。因此磁珠-抗體偶聯物與堿性磷酸酶-抗體偶聯物在化學發光試劑盒中可作為固相捕獲試劑和酶標試劑用于檢測血清中的痕量抗原。與辣根過氧化物酶(HRP)相比，堿性磷酸酶具有穩定性和高敏感性的優勢。AP在生物學尤其是分子生物學和免疫學領域有著廣泛的應用。

辣根過氧化物酶，簡稱HRP，HRP是一種單鏈多肽，含有4個二硫橋。它是一種糖蛋白，含有18％的碳水化合物。該碳水化合物組成包括半乳糖，阿拉伯糖，木糖，巖藻糖，甘露糖，甘露糖胺，半乳糖胺，這取決于特定的同功酶。 它的分子量（44 kDa）包括分子量（33,890道爾頓）的多肽鏈，血紅素加Ca2 +（700道爾頓），碳水化合物（約9,400道爾頓）。有7種HRP的同工酶存在。辣根過氧化物酶的等電點范圍從3.0 - 9.0。辣根過氧化物酶是目前使用廣泛的一種標記酶，用來標記抗體或其它蛋白質，既能用于定位檢測，也能用于定量測定。 辣根過氧化物酶（HRP）的從辣根根（Amoracia RUSTICANA）中分離。它是用于生物化學中的應用，如western印跡，ELISA和免疫組化。辣根過氧化物酶是用來放大弱信號，增加被探測的目標分子，如蛋白質。它通常被用于確定葡萄糖和溶液中的過氧化物的量。它也被用于在煙曲霉快速藥敏測定。

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