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人鼠嵌合抗體表達

發布時間:2021-06-09 點擊數:1121
基因工程抗體的發展極大地推動了抗體技術的進步以及抗體藥物和診斷試劑的研發。制備基因工程抗體涉及一整套步驟,包括基因克隆、載體構建、表達篩選、抗體制備和親和力測定等。西寶生物提供技術支持,以協助您成功進行基因工程抗體的制備過程。
通過先進的技術平臺和專業的技術人員,西寶生物能夠將您的鼠源單克隆抗體進行人源嵌合化改造,或者將您的小分子抗體進行全長改造。利用DNA重組技術,西寶生物可以將鼠單抗的輕鏈和重鏈可變區基因插入含有人抗體恒定區的表達載體中,然后將其轉化為哺乳動物細胞,從而制備出人鼠嵌合抗體。這些嵌合抗體的人源化程度可達到約70%,充分保留了異源單抗的可變區,較大限度地保持了其親和性,并降低了免疫原性。
嵌合單克隆抗體的定義與原理
嵌合抗體是將一個物種(如小鼠)的可變區與另一個物種(如人類)的恒定區結合而形成的結構性嵌合體。它是開發治療性單克隆抗體時降低免疫原性、延長血清半衰期的重要步驟。通過將一個物種的恒定區替換為另一個物種的恒定區,甚至在同一物種內將一個亞型替換為另一個亞型,可以實現抗體的人源化。然而,這個過程可能具有挑戰性。
西寶生物提供嵌合抗體的構建和生產服務,涵蓋人、小鼠、兔、大鼠、犬等多種物種。您只需提供抗體全長序列或可變區基因序列,我們將為您交付高質量的嵌合抗體。隨時歡迎咨詢,西寶生物的技術專家將為您提供支持。
嵌合抗體制備過程與應用
制備人-鼠嵌合單克隆抗體
如何制備人-鼠嵌合單克隆抗體
服務內容
嵌合抗體是通過基因工程技術制備的,即將選定的小鼠雜交瘤免疫球蛋白(Ig)的可變區與人Ig的恒定區連接起來,構建嵌合抗體。制備過程包括以下步驟:
1.收集小鼠脾臟并分離B細胞。
2.融合B細胞與骨髓瘤細胞,形成雜交瘤細胞,篩選出抗原特異性IgG陽性克隆。
3.分離小鼠VH和VL的DNA序列,以及人免疫球蛋白恒定區的DNA序列。
4.通過基因工程構建小鼠/人嵌合基因,將其轉染至哺乳動物細胞。
5.選擇高表達嵌合IgG的克隆,并從培養上清液中純化IgG。
嵌合抗體在治療和免疫測定中具有重要應用。在免疫組織化學或ELISA等檢測中,通過轉換抗體恒定區以匹配宿主或二抗的物種,可以顯著降低背景染色等問題。
服務信息
電話: 400-021-8158
 

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