重組糖苷酶PNGaseF

  • 別名：N-糖酰胺酶F；N-糖苷酶F
  • 編碼：ECE0441E
  • 級別：
  • 簡介：PNGase F是一種酰胺酶，切割糖蛋白上的N-連接糖，切割的糖型有：高甘露糖、雜合和復雜寡糖，切割位點為：內側的N-乙酰葡糖胺（GlcNAc）和天冬酰胺之間。應用于抗體和糖蛋白的N-糖基全部去除。
品牌 貨號 包裝規(guī)格 庫存 價格 數(shù)量
Seebio ECE0441E-15KU 15KU 有 1,752 元
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Seebio ECE0441E-40KU 40KU 有 3,620 元
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基礎信息

CAS83534-39-8
來源伊麗莎白菌 E.coli重組表達
純度>95%
酶存儲緩沖液20mM Tris-HCl,100mM NaCl,5mM EDTA,50%Glycerol,pH=7.7
組成成分PNGase F；10×變性緩沖液；10×糖苷酶緩沖液；10%NP-40
存儲溫度-20℃
有效期12個月
應用抗體和糖蛋白的N-糖基全部去除

產(chǎn)品介紹

【產(chǎn)品描述】

PNGase F是一種酰胺酶，切割糖蛋白上的N-連接糖，切割的糖型有：高甘露糖、雜合和復雜寡糖，切割位點為：內側的N-乙酰葡糖胺（GlcNAc）和天冬酰胺之間。使得糖蛋白釋放以天冬酰胺連接的糖分子，并使得天冬酰胺轉化為天冬氨酸本公司PNGase是E.coli重組表達，并經(jīng)多步純化制備的重組蛋白。可以提供不含甘油形式，便于在HPLC方法中取得較佳作用。

【酶活定義】

一個單位是指10μL的反應體系中，37°℃反應1小時從10μg變性RNase B中除去超過95%的碳水化合物所需要的酶量。

【組成成分】

組分

規(guī)格1

規(guī)格2

PNGase F

20KU

40KU

10×變性緩沖液

200uL

200uL

10×糖苷酶切緩沖液

200uL

200uL

10% NP-40

200uL

200uL


【使用方法 僅供參考】

變性酶切

1、用去離子水溶解1-20μg糖蛋白，加入1μl10×變性緩沖液，并用去離子水定溶至10μl。100℃孵育10 min。

轉移至冰上，并離心10s。

2、 加入2μl 10×糖苷酶切緩沖液，2μl 10%NP-40,5μl去離子水，混勻。

3、加入1μl PNGase F，37°℃孵育60 min，進行SDS-PAGE或HPLC分析。


非變性酶切

1、用去離子水溶解1-20μg糖蛋白，加入1μl10×糖苷酶切緩沖液，2-4μl PNGase F，并用去離子水定溶至10μl，

37℃孵育2h-過夜。

2、進行SDS-PAGE或HPLC分析。


【注意事項】

本品復溶后盡量避免反復凍融；

變性酶切的效率較高，應先進行嘗試。如果遇到無法進行變性酶切(例如變性過程中出現(xiàn)沉淀),可嘗試非變性酶切，但酶切效率可能會下降，建議增加酶量并延長酶切時間。

使用時請穿實驗服并佩戴一次性手套；


質量指標

MSDS

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