
1.項(xiàng)目背景
肝素結(jié)合蛋白(heparin-binding protein,HBP)是來源于成熟中性粒細(xì)胞的顆粒蛋白,主要儲存于嗜天青顆粒中,少部分儲存于分泌小泡中。HBP是絲氨酸蛋白酶家族成員,無蛋白酶活性,對脂多糖脂質(zhì)A具有高親和力。
中性粒細(xì)胞活化后脫顆粒,即釋放出HBP。當(dāng)發(fā)生急性細(xì)菌性感染時,血液中HBP的濃度可在1-2h內(nèi)明顯升高,而病毒性感染時HBP不升高或輕度升高。HBP同時也可作為致病因子,當(dāng)患者接受有效治療后HBP濃度則很快下降。因此,檢測患者血液中HBP含量可輔助臨床進(jìn)行急性細(xì)菌性感染的診斷及預(yù)測、感染嚴(yán)重程度判斷及抗生素療效監(jiān)測。與傳統(tǒng)炎癥指標(biāo)相比,在細(xì)菌性感染時,HBP升高更快,特異性更好。
HBP的臨床應(yīng)用:
a)感染性疾病的輔助診斷及鑒別診斷;
b)HBP濃度與感染的嚴(yán)重程度呈正相關(guān),可用于感染嚴(yán)重程度的評估;
c)膿毒癥的輔助診斷。HBP已錄入《中國嚴(yán)重膿毒癥/膿毒性休克治療指南(2014)》,并獲得《中國膿毒癥早期預(yù)防與阻斷急診專家共識2020》推薦,是診斷膿毒癥的優(yōu)異指標(biāo)。
d)膿毒癥預(yù)后評估。HBP半衰期小于1h,可快速反映患者的治療效果。HBP作為致病因子,其濃度與膿毒癥的預(yù)后密切相關(guān)。
2.性能表現(xiàn)
2.1 化學(xué)發(fā)光(AE)平臺:
組合:肝素結(jié)合蛋白(HBP)單克隆抗體(貨號:EKY0855A)包被羧基磁珠+肝素結(jié)合蛋白(HBP)單克隆抗體(貨號:EKY0856A)標(biāo)記吖啶酯;
線性范圍:5.9ng/mL-300ng/mL;

化學(xué)發(fā)光(吖啶酯)平臺校準(zhǔn)曲線
2.2 熒光免疫層析平臺
組合2:肝素結(jié)合蛋白(HBP)單克隆抗體(貨號:EKY0856A)標(biāo)記熒光微球+肝素結(jié)合蛋白(HBP)單克隆抗體(貨號:EKY0855A)劃膜;
線性范圍:5.9ng/mL-300ng/mL。
2.3 化學(xué)發(fā)光(AP)平臺
組合3:肝素結(jié)合蛋白(HBP)單克隆抗體(貨號:EKY0855A)包被羧基磁珠+肝素結(jié)合蛋白(HBP)單克隆抗體(貨號:EKY0856A)標(biāo)記堿性磷酸酶;
線性范圍:5.9ng/mL-300ng/mL。
3.臨床相關(guān)性
3.1 化學(xué)發(fā)光(AE)平臺
西寶生物發(fā)光(AE)平臺HBP抗體配對組合1與中翰盛泰HBP試劑(熒光免疫層析)賦值的臨床樣本相關(guān)性R2在0.95左右,相關(guān)性較好。

3.2 熒光免疫層析平臺
西寶生物發(fā)光(熒光層析)平臺HBP抗體配對組合2與中翰盛泰HBP試劑(熒光免疫層析)賦值的臨床樣本相關(guān)性R2在0.95左右,相關(guān)性較好。

3.3 化學(xué)發(fā)光(AP)平臺
西寶生物發(fā)光(AP)平臺HBP抗體配對組合3與中翰盛泰HBP試劑(熒光免疫層析)賦值的臨床樣本相關(guān)性R²在0.95左右,相關(guān)性較好。

4.測試方案
4.1化學(xué)發(fā)光(AE)平臺
待測抗原:肝素結(jié)合蛋白抗原(HBP antigen)(貨號:EDD0159B/EDD0159C),樣本/標(biāo)準(zhǔn)品:加樣量10ul;
試劑1:肝素結(jié)合蛋白(HBP)單克隆抗體(貨號:EKY0855A)包被-磁珠稀釋物,用量50ul/測試;
試劑2:肝素結(jié)合蛋白(HBP)單克隆抗體(貨號:EKY0856A)標(biāo)記-吖啶酯稀釋物,用量50ul/測試;
反應(yīng)條件:
第一步:10ul樣本+50ul試劑1+50ul試劑2混合,37℃孵育10min,清洗;
第二步:加入預(yù)激發(fā)液及激發(fā)液,進(jìn)行測試。
測試使用發(fā)光儀器:科斯邁SMART 500S。
4.2熒光免疫層析平臺:
待測抗原:肝素結(jié)合蛋白抗原(HBP antigen)(貨號:EDD0159B/EDD0159C),樣本/標(biāo)準(zhǔn)品:加樣量5ul;
反應(yīng)條件:樣本+熒光液混勻,上樣,反應(yīng)時間(10min-15min);
測試使用熒光儀器:和邁FIC-S100。
4.3化學(xué)發(fā)光(AP)平臺
待測抗原:肝素結(jié)合蛋白抗原(HBP antigen)(貨號:EDD0159B/EDD0159C),樣本/標(biāo)準(zhǔn)品:加樣量20ul;
試劑1:肝素結(jié)合蛋白(HBP)單克隆抗體(貨號:EKY0855A)包被-磁珠稀釋物,用量50ul/測試;
試劑2:肝素結(jié)合蛋白(HBP)單克隆抗體(貨號:EKY0856A)標(biāo)記-堿性磷酸酶稀釋物,用量50ul/測試;
反應(yīng)條件:
第一步:20ul樣本+50ul試劑1+50ul試劑2混合,37℃孵育10min,清洗;
第二步:加入底物,進(jìn)行測試。
測試使用發(fā)光儀器:迎凱Shine i2900。
5. 產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 推薦配對 |
肝素結(jié)合蛋白(HBP)單克隆抗體 | EKY0855A | 肝素結(jié)合蛋白(HBP)單克隆抗體(貨號:EKY0855A)包被羧基磁珠+肝素結(jié)合蛋白(HBP)單克隆抗體(貨號:EKY0856A)標(biāo)記吖啶酯(發(fā)光配對組合1) 肝素結(jié)合蛋白(HBP)單克隆抗體(貨號:EKY0856A)標(biāo)記熒光微球+肝素結(jié)合蛋白(HBP)單克隆抗體(貨號:EKY0855A)劃膜(熒光配對組合2) 肝素結(jié)合蛋白(HBP)單克隆抗體(貨號:EKY0855A)包被羧基磁珠+肝素結(jié)合蛋白(HBP)單克隆抗體(貨號:EKY0856A)標(biāo)記堿性磷酸酶(發(fā)光配對組合3) |
肝素結(jié)合蛋白(HBP)單克隆抗體 | EKY0856A | |
肝素結(jié)合蛋白抗原(HBP antigen) | EDD0159B | |
肝素結(jié)合蛋白抗原(HBP antigen) | EDD0159C | |
肝素結(jié)合蛋白(HBP)單克隆抗體 (貨號:EKY0855A)-羧基磁珠濃縮液 | DKY1313A | |
肝素結(jié)合蛋白(HBP)單克隆抗體(貨號:EKY0856A)-吖啶酯濃縮液 | DKY1313B | |
肝素結(jié)合蛋白(HBP)單克隆抗體(貨號:EKY0856A)標(biāo)記熒光微球濃縮液 | DKY1313C | |
肝素結(jié)合蛋白(HBP)單克隆抗體(貨號:EKY0856A)-堿性磷酸酶濃縮液 | DKY1313D | |
羧基磁性微球,1.5um | DEG0800C | |
時間分辨熒光微球,羧基(200nm) | AEG0786B | |
AMPPD 發(fā)光底物液(即用型) | DCD0517A | |
AMPPD 發(fā)光底物液(即用型) | DCD0517B |
部分圖片來源于網(wǎng)絡(luò)

1.項(xiàng)目背景
肝素結(jié)合蛋白(heparin-binding protein,HBP)是來源于成熟中性粒細(xì)胞的顆粒蛋白,主要儲存于嗜天青顆粒中,少部分儲存于分泌小泡中。HBP是絲氨酸蛋白酶家族成員,無蛋白酶活性,對脂多糖脂質(zhì)A具有高親和力。
中性粒細(xì)胞活化后脫顆粒,即釋放出HBP。當(dāng)發(fā)生急性細(xì)菌性感染時,血液中HBP的濃度可在1-2h內(nèi)明顯升高,而病毒性感染時HBP不升高或輕度升高。HBP同時也可作為致病因子,當(dāng)患者接受有效治療后HBP濃度則很快下降。因此,檢測患者血液中HBP含量可輔助臨床進(jìn)行急性細(xì)菌性感染的診斷及預(yù)測、感染嚴(yán)重程度判斷及抗生素療效監(jiān)測。與傳統(tǒng)炎癥指標(biāo)相比,在細(xì)菌性感染時,HBP升高更快,特異性更好。
HBP的臨床應(yīng)用:
a)感染性疾病的輔助診斷及鑒別診斷;
b)HBP濃度與感染的嚴(yán)重程度呈正相關(guān),可用于感染嚴(yán)重程度的評估;
c)膿毒癥的輔助診斷。HBP已錄入《中國嚴(yán)重膿毒癥/膿毒性休克治療指南(2014)》,并獲得《中國膿毒癥早期預(yù)防與阻斷急診專家共識2020》推薦,是診斷膿毒癥的優(yōu)異指標(biāo)。
d)膿毒癥預(yù)后評估。HBP半衰期小于1h,可快速反映患者的治療效果。HBP作為致病因子,其濃度與膿毒癥的預(yù)后密切相關(guān)。
2.性能表現(xiàn)
2.1 化學(xué)發(fā)光(AE)平臺:
組合:肝素結(jié)合蛋白(HBP)單克隆抗體(貨號:EKY0855A)包被羧基磁珠+肝素結(jié)合蛋白(HBP)單克隆抗體(貨號:EKY0856A)標(biāo)記吖啶酯;
線性范圍:5.9ng/mL-300ng/mL;

化學(xué)發(fā)光(吖啶酯)平臺校準(zhǔn)曲線
2.2 熒光免疫層析平臺
組合2:肝素結(jié)合蛋白(HBP)單克隆抗體(貨號:EKY0856A)標(biāo)記熒光微球+肝素結(jié)合蛋白(HBP)單克隆抗體(貨號:EKY0855A)劃膜;
線性范圍:5.9ng/mL-300ng/mL。
2.3 化學(xué)發(fā)光(AP)平臺
組合3:肝素結(jié)合蛋白(HBP)單克隆抗體(貨號:EKY0855A)包被羧基磁珠+肝素結(jié)合蛋白(HBP)單克隆抗體(貨號:EKY0856A)標(biāo)記堿性磷酸酶;
線性范圍:5.9ng/mL-300ng/mL。
3.臨床相關(guān)性
3.1 化學(xué)發(fā)光(AE)平臺
西寶生物發(fā)光(AE)平臺HBP抗體配對組合1與中翰盛泰HBP試劑(熒光免疫層析)賦值的臨床樣本相關(guān)性R2在0.95左右,相關(guān)性較好。

3.2 熒光免疫層析平臺
西寶生物發(fā)光(熒光層析)平臺HBP抗體配對組合2與中翰盛泰HBP試劑(熒光免疫層析)賦值的臨床樣本相關(guān)性R2在0.95左右,相關(guān)性較好。

3.3 化學(xué)發(fā)光(AP)平臺
西寶生物發(fā)光(AP)平臺HBP抗體配對組合3與中翰盛泰HBP試劑(熒光免疫層析)賦值的臨床樣本相關(guān)性R²在0.95左右,相關(guān)性較好。

4.測試方案
4.1化學(xué)發(fā)光(AE)平臺
待測抗原:肝素結(jié)合蛋白抗原(HBP antigen)(貨號:EDD0159B/EDD0159C),樣本/標(biāo)準(zhǔn)品:加樣量10ul;
試劑1:肝素結(jié)合蛋白(HBP)單克隆抗體(貨號:EKY0855A)包被-磁珠稀釋物,用量50ul/測試;
試劑2:肝素結(jié)合蛋白(HBP)單克隆抗體(貨號:EKY0856A)標(biāo)記-吖啶酯稀釋物,用量50ul/測試;
反應(yīng)條件:
第一步:10ul樣本+50ul試劑1+50ul試劑2混合,37℃孵育10min,清洗;
第二步:加入預(yù)激發(fā)液及激發(fā)液,進(jìn)行測試。
測試使用發(fā)光儀器:科斯邁SMART 500S。
4.2熒光免疫層析平臺:
待測抗原:肝素結(jié)合蛋白抗原(HBP antigen)(貨號:EDD0159B/EDD0159C),樣本/標(biāo)準(zhǔn)品:加樣量5ul;
反應(yīng)條件:樣本+熒光液混勻,上樣,反應(yīng)時間(10min-15min);
測試使用熒光儀器:和邁FIC-S100。
4.3化學(xué)發(fā)光(AP)平臺
待測抗原:肝素結(jié)合蛋白抗原(HBP antigen)(貨號:EDD0159B/EDD0159C),樣本/標(biāo)準(zhǔn)品:加樣量20ul;
試劑1:肝素結(jié)合蛋白(HBP)單克隆抗體(貨號:EKY0855A)包被-磁珠稀釋物,用量50ul/測試;
試劑2:肝素結(jié)合蛋白(HBP)單克隆抗體(貨號:EKY0856A)標(biāo)記-堿性磷酸酶稀釋物,用量50ul/測試;
反應(yīng)條件:
第一步:20ul樣本+50ul試劑1+50ul試劑2混合,37℃孵育10min,清洗;
第二步:加入底物,進(jìn)行測試。
測試使用發(fā)光儀器:迎凱Shine i2900。
5. 產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 推薦配對 |
肝素結(jié)合蛋白(HBP)單克隆抗體 | EKY0855A | 肝素結(jié)合蛋白(HBP)單克隆抗體(貨號:EKY0855A)包被羧基磁珠+肝素結(jié)合蛋白(HBP)單克隆抗體(貨號:EKY0856A)標(biāo)記吖啶酯(發(fā)光配對組合1) 肝素結(jié)合蛋白(HBP)單克隆抗體(貨號:EKY0856A)標(biāo)記熒光微球+肝素結(jié)合蛋白(HBP)單克隆抗體(貨號:EKY0855A)劃膜(熒光配對組合2) 肝素結(jié)合蛋白(HBP)單克隆抗體(貨號:EKY0855A)包被羧基磁珠+肝素結(jié)合蛋白(HBP)單克隆抗體(貨號:EKY0856A)標(biāo)記堿性磷酸酶(發(fā)光配對組合3) |
肝素結(jié)合蛋白(HBP)單克隆抗體 | EKY0856A | |
肝素結(jié)合蛋白抗原(HBP antigen) | EDD0159B | |
肝素結(jié)合蛋白抗原(HBP antigen) | EDD0159C | |
肝素結(jié)合蛋白(HBP)單克隆抗體 (貨號:EKY0855A)-羧基磁珠濃縮液 | DKY1313A | |
肝素結(jié)合蛋白(HBP)單克隆抗體(貨號:EKY0856A)-吖啶酯濃縮液 | DKY1313B | |
肝素結(jié)合蛋白(HBP)單克隆抗體(貨號:EKY0856A)標(biāo)記熒光微球濃縮液 | DKY1313C | |
肝素結(jié)合蛋白(HBP)單克隆抗體(貨號:EKY0856A)-堿性磷酸酶濃縮液 | DKY1313D | |
羧基磁性微球,1.5um | DEG0800C | |
時間分辨熒光微球,羧基(200nm) | AEG0786B | |
AMPPD 發(fā)光底物液(即用型) | DCD0517A | |
AMPPD 發(fā)光底物液(即用型) | DCD0517B |
部分圖片來源于網(wǎng)絡(luò)