人腺病毒(Human adenovirus, HAdV)肺炎(以下簡稱腺病毒肺炎)是兒童社區(qū)獲得性肺炎中較為嚴(yán)重的類型之一，多發(fā)于6個(gè)月至5歲兒童，部分患兒臨床表現(xiàn)重，肺外并發(fā)癥多，重癥病例易遺留慢性氣道和肺疾病，是目前造成嬰幼兒肺炎死亡和致殘的重要原因之一，需要高度關(guān)注。

HAdV屬于哺乳動(dòng)物腺病毒屬，為無包膜的雙鏈DNA病毒，1953年由Rowe等首次發(fā)現(xiàn)。目前已發(fā)現(xiàn)至少90個(gè)基因型，分為A～G共7個(gè)亞屬，不同型別HAdV的組織嗜性、致病力、流行地區(qū)等特性不同。HAdV感染可引起多種疾病，包括肺炎、支氣管炎、膀胱炎、眼結(jié)膜炎、胃腸道疾病及腦炎等。與呼吸道感染相關(guān)的HAdV主要有B亞屬(HAdV-3、7、11、14、16、21、50、55型)，C亞屬(HAdV-1、2、5、6、57型)和E亞屬(HAdV-4型)。腺病毒肺炎約占社區(qū)獲得性肺炎的4%～10%，重癥肺炎以3型及7型多見，HAdV-7B型是2019年我國南方發(fā)病地區(qū)主要流行株。

人腺病毒感染潛伏期一般為2～21 d，平均為3～8 d，潛伏期末至發(fā)病急性期傳染性強(qiáng)。有癥狀的感染者和無癥狀的隱性感染者均為傳染源。傳播途徑包括：(1)飛沫傳播：是呼吸道感染腺病毒的主要傳播方式；(2)接觸傳播：手接觸被腺病毒污染的物體或表面后，未經(jīng)洗手而觸摸口、鼻或眼睛；(3)糞口傳播：接觸腺病毒感染者的糞便。腺病毒肺炎常發(fā)生于6個(gè)月～5歲，尤其是2歲以下兒童?；悸曰A(chǔ)疾病和免疫功能受損者(如器官移植、HIV感染、原發(fā)性免疫缺陷等)更易發(fā)生重癥。

(1)病毒分離和血清學(xué)鑒定：傳統(tǒng)的病毒分離和血清分型方法雖是診斷腺病毒的金標(biāo)準(zhǔn)，但不適于臨床早期診斷。

(2)抗原檢測：針對腺病毒衣殼六鄰體抗原進(jìn)行檢測，多采用免疫熒光方法，標(biāo)本為鼻咽抽吸物、鼻咽拭子、痰液及肺泡灌洗液，發(fā)病3～5 d內(nèi)檢出率高，重癥病例2～3周仍可陽性。

(3)PCR檢測：比傳統(tǒng)的病毒培養(yǎng)和病毒抗原檢測敏感性更高，標(biāo)本為鼻咽拭子或痰液、支氣管肺泡灌洗液等。實(shí)時(shí)定量PCR可對病毒進(jìn)行定量分析，幫助預(yù)測病情嚴(yán)重程度。

(4)其他方法：宏基因測序在診斷腺病毒感染以及分型方面具有優(yōu)勢，但價(jià)格昂貴，結(jié)果需要專業(yè)人員判定，不推薦常規(guī)開展。該方法主要用于特殊人群，如合并基礎(chǔ)疾病、免疫缺陷病、其他方法檢測陰性或病情危重，以及混合感染需盡早明確病原的患兒，結(jié)果判斷必須結(jié)合臨床。

本文所述人腺病毒抗原檢測試劑是指利用膠體金免疫層析法或彩色乳膠免疫層析法等基于抗原抗體反應(yīng)原理，針對嬰幼兒糞便標(biāo)本中的腺病毒抗原進(jìn)行體外定性檢測的試劑，輔助醫(yī)生診斷。

2.1.1抗體配對組合：腺病毒（ADV）抗體（貨號：EKY0309D）標(biāo)記膠體金（噴在釋放墊上）+腺病毒（ADV）抗體（貨號：EKY0309C）劃膜；

2.1.2 腺病毒（ADV）抗原（貨號：EKY0218B）用合適的稀釋液依次稀釋到10ug/mL、5ug/mL、1ug/mL、0.1ug/mL、50ng/mL、10ng/mL。

2.1.3反應(yīng)模式：10uL樣品+90uL稀釋液混勻，取80uL混合液上樣，反應(yīng)時(shí)間15min-20min；

2.1.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果：在膠體金免疫層析平臺，采用此抗體配對組合測試腺病毒（ADV）抗原稀釋梯度均顯色，測試三例陰性樣品均不顯色，靈敏度可達(dá)10ng/mL，表明此抗體配對在膠體金層析平臺測試性能良好。

2.2.1抗體配對組合：腺病毒（ADV）抗體（貨號：EKY0309C）標(biāo)記彩色乳膠（噴在釋放墊上）+腺病毒（ADV）抗體（貨號：EKY0309D）劃膜；

2.2.2 ADV腺病毒抗原（貨號：EKY0218B）用合適的稀釋液依次稀釋到10ug/mL、5ug/mL、1ug/mL、0.1ug/mL、50ng/mL、10ng/mL、5ng/mL、1ng/mL、0.2ng/mL。

2.2.3反應(yīng)模式：10uL樣品+90uL稀釋液混勻，取80uL混合液上樣，反應(yīng)時(shí)間15min-20min；

2.2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果：在彩色乳膠免疫層析平臺，采用此抗體配對組合測試腺病毒（ADV）抗原稀釋梯度均顯色，測試三例陰性樣品均不顯色，靈敏度可達(dá)0.2ng/mL，表明此抗體配對在彩色乳膠免疫層析平臺測試性能良好。